Posted by on 1 lutego 2019

Egzoncje i 2 protoonkogenów H-ras, K-ras i N-ras zostały zsekwencjonowane tą samą metodą.19 Ekspresja i funkcja zmutowanego receptora
Dzikie typy i zmutowane receptory subklonowano w konstruktach opartych na pSVL i weryfikowano przez sekwencjonowanie. Komórki COS-7 transfekowano przejściowo konstruktami receptora dzikiego lub zmutowanego receptora przy użyciu metody dietyloaminoetylo-dekstran i analizowano 72 godziny po transfekcji.15 Wszystkie doświadczenia przeprowadzono trzykrotnie i co najmniej trzy razy.
W celu zbadania cyklicznego wytwarzania AMP komórki inkubowano przez 60 minut w buforze Krebs-Ringer-HEPES zawierającym różne ilości tyreotropiny i 25 .M inhibitora fosfodiesterazy rolipram. Cykliczne AMP zmierzono po tym, jak komórki zagotowano w wodzie. 20 W celu zbadania akumulacji fosforanu inozytolu znakowany trytem inozytol (mio- [2-3H] inozytol) (Dupont-NEN, Haren, Belgia) został dodany w ciągu ostatnich 24 godziny hodowli, po czym pożywkę zastąpiono buforem Krebsa-Ringera-HEPES zawierającym 10 mM chlorku litu i różne ilości tyreotropiny. Po inkubacji przez 30 minut dodano lodowaty 3% kwas nadchlorowy, a następnie wyodrębniono fosforany inozytolu znakowane trytem i oznaczono je za pomocą chromatografii. 15, 16. Aby określić stopień wiązania tyreotropiny z receptorem, komórki przemyto dwukrotnie Środowisko Hanksa (chlorek sodu zastąpiony 280 mM sacharozą) i 0,2% albuminy surowicy bydlęcej, a następnie inkubowane z znakowaną 125I tyreotropiną (Henning, Berlin, Niemcy) i różnymi ilościami nieznakowanej tyreotropiny przez cztery godziny w temperaturze 4 ° C w tym samym medium . Komórki następnie przepłukano dwukrotnie zimnym buforem i rozpuszczono w M wodorotlenku sodu, a radioaktywność związaną z komórką zmierzono w liczniku gamma.
Wyniki
Identyfikacja mutacji w genie receptora tyreotropiny
Rycina 2. Rycina 2. Sekwencja nukleotydowa segmentu genu, który koduje część szóstego segmentu transbłonowego receptora tyreotropiny, pokazując mutację heterozygotyczną u pacjenta z wrodzoną nadczynnością tarczycy. Mutacja, TTC . CTC, spowodowała substytucję leucyny dla fenyloalaniny w pozycji 631 w jednym allelu. Sekwencja typu dzikiego (normalna) jest pokazana dla porównania.
Rycina 3. Rycina 3. Struktura aminokwasu receptora tyreotropinowego i umiejscowienie Mutacji Wzmocnienia w Badaniu Pacjenta, Pacjentów z Hyperfunctioning gruczolaków tarczycy i dwóch rodzin z Mutations Germ-Line powodujących autosomalny dominujący Nonautoimmune dziedziczne nadczynność tarczycy. Nie pokazano długiego końca aminowego na końcu receptora. Numeracja reszt rozpoczyna się przy kodonie inicjatora.
Przemianę tyminy na cytozynę (T-to-C) w segmencie genu kodującego szósty region transbłonowy receptora zidentyfikowano w DNA z leukocytów pacjenta i tkanki guzowatej i nienowotworowej tarczycy. Pacjent był heterozygotyczny pod względem mutacji, co spowodowało substytucję leucyny (CTC) dla fenyloalaniny (TTC) w pozycji 631 w jednym allelu (Figura 2). Natomiast rodzice i siostra pacjenta mieli tylko sekwencję typu dzikiego, co wskazuje, że pacjent miał nową mutację linii zarodkowej
[hasła pokrewne: nalewka z pigwowca z miodem, leczenie boreliozy kraków, krwawienie z przewodu pokarmowego icd 10 ]

  1. Junkyard Dog
    11 stycznia 2019

    Nie podoba mi sie to co sie dowiedzialem

  2. Onion King
    13 stycznia 2019

    [..] odnosnik do informacji w naukowej publikacji odnosnie: Odszkodowanie zdrowotne[…]

  3. Klara
    15 stycznia 2019

    skarżę się od paru lat na bóle głowy

  4. Night Train
    17 stycznia 2019

    [..] Odniesienie w tekscie do Astma w ciąży[…]

  5. Norbert
    19 stycznia 2019

    Włókniaki można potraktować Brodacidem

  6. Kickstart
    21 stycznia 2019

    Article marked with the noticed of: stoły do masażu[…]

  7. Dagmara
    23 stycznia 2019

    Chyba ktoś w tym artykule zapomniał o medycynie mitochondrialno komórkowej

Powiązane tematy z artykułem: krwawienie z przewodu pokarmowego icd 10 leczenie boreliozy kraków nalewka z pigwowca z miodem

Posted by on 1 lutego 2019

Egzoncje i 2 protoonkogenów H-ras, K-ras i N-ras zostały zsekwencjonowane tą samą metodą.19 Ekspresja i funkcja zmutowanego receptora
Dzikie typy i zmutowane receptory subklonowano w konstruktach opartych na pSVL i weryfikowano przez sekwencjonowanie. Komórki COS-7 transfekowano przejściowo konstruktami receptora dzikiego lub zmutowanego receptora przy użyciu metody dietyloaminoetylo-dekstran i analizowano 72 godziny po transfekcji.15 Wszystkie doświadczenia przeprowadzono trzykrotnie i co najmniej trzy razy.
W celu zbadania cyklicznego wytwarzania AMP komórki inkubowano przez 60 minut w buforze Krebs-Ringer-HEPES zawierającym różne ilości tyreotropiny i 25 .M inhibitora fosfodiesterazy rolipram. Cykliczne AMP zmierzono po tym, jak komórki zagotowano w wodzie. 20 W celu zbadania akumulacji fosforanu inozytolu znakowany trytem inozytol (mio- [2-3H] inozytol) (Dupont-NEN, Haren, Belgia) został dodany w ciągu ostatnich 24 godziny hodowli, po czym pożywkę zastąpiono buforem Krebsa-Ringera-HEPES zawierającym 10 mM chlorku litu i różne ilości tyreotropiny. Po inkubacji przez 30 minut dodano lodowaty 3% kwas nadchlorowy, a następnie wyodrębniono fosforany inozytolu znakowane trytem i oznaczono je za pomocą chromatografii. 15, 16. Aby określić stopień wiązania tyreotropiny z receptorem, komórki przemyto dwukrotnie Środowisko Hanksa (chlorek sodu zastąpiony 280 mM sacharozą) i 0,2% albuminy surowicy bydlęcej, a następnie inkubowane z znakowaną 125I tyreotropiną (Henning, Berlin, Niemcy) i różnymi ilościami nieznakowanej tyreotropiny przez cztery godziny w temperaturze 4 ° C w tym samym medium . Komórki następnie przepłukano dwukrotnie zimnym buforem i rozpuszczono w M wodorotlenku sodu, a radioaktywność związaną z komórką zmierzono w liczniku gamma.
Wyniki
Identyfikacja mutacji w genie receptora tyreotropiny
Rycina 2. Rycina 2. Sekwencja nukleotydowa segmentu genu, który koduje część szóstego segmentu transbłonowego receptora tyreotropiny, pokazując mutację heterozygotyczną u pacjenta z wrodzoną nadczynnością tarczycy. Mutacja, TTC . CTC, spowodowała substytucję leucyny dla fenyloalaniny w pozycji 631 w jednym allelu. Sekwencja typu dzikiego (normalna) jest pokazana dla porównania.
Rycina 3. Rycina 3. Struktura aminokwasu receptora tyreotropinowego i umiejscowienie Mutacji Wzmocnienia w Badaniu Pacjenta, Pacjentów z Hyperfunctioning gruczolaków tarczycy i dwóch rodzin z Mutations Germ-Line powodujących autosomalny dominujący Nonautoimmune dziedziczne nadczynność tarczycy. Nie pokazano długiego końca aminowego na końcu receptora. Numeracja reszt rozpoczyna się przy kodonie inicjatora.
Przemianę tyminy na cytozynę (T-to-C) w segmencie genu kodującego szósty region transbłonowy receptora zidentyfikowano w DNA z leukocytów pacjenta i tkanki guzowatej i nienowotworowej tarczycy. Pacjent był heterozygotyczny pod względem mutacji, co spowodowało substytucję leucyny (CTC) dla fenyloalaniny (TTC) w pozycji 631 w jednym allelu (Figura 2). Natomiast rodzice i siostra pacjenta mieli tylko sekwencję typu dzikiego, co wskazuje, że pacjent miał nową mutację linii zarodkowej
[hasła pokrewne: nalewka z pigwowca z miodem, leczenie boreliozy kraków, krwawienie z przewodu pokarmowego icd 10 ]

  1. Junkyard Dog
    11 stycznia 2019

    Nie podoba mi sie to co sie dowiedzialem

  2. Onion King
    13 stycznia 2019

    [..] odnosnik do informacji w naukowej publikacji odnosnie: Odszkodowanie zdrowotne[…]

  3. Klara
    15 stycznia 2019

    skarżę się od paru lat na bóle głowy

  4. Night Train
    17 stycznia 2019

    [..] Odniesienie w tekscie do Astma w ciąży[…]

  5. Norbert
    19 stycznia 2019

    Włókniaki można potraktować Brodacidem

  6. Kickstart
    21 stycznia 2019

    Article marked with the noticed of: stoły do masażu[…]

  7. Dagmara
    23 stycznia 2019

    Chyba ktoś w tym artykule zapomniał o medycynie mitochondrialno komórkowej

Powiązane tematy z artykułem: krwawienie z przewodu pokarmowego icd 10 leczenie boreliozy kraków nalewka z pigwowca z miodem